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染色質(zhì)免疫共沉淀CHIP實驗

簡要描述：染色質(zhì)免疫共沉淀CHIP實驗的原理是在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復合物，并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小 片段，然后通過免疫學方法沉淀此復合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA的片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋 白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

  • 更新時間：2022-12-23
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詳細介紹

實驗原理：
在保持組蛋白和DNA聯(lián)合的同時，染色質(zhì)被切成很小的片斷，通過運用對應于一個特定組蛋白標記的生物抗體，將目標片段（組蛋白發(fā)生特異標記的片段）沉淀下來。ChIP是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合以及細菌蛋白質(zhì)的“protein A”特異性地結(jié)合到免疫球蛋白的Fc片段的現(xiàn)象合用開發(fā)出來的方法（免疫磁珠結(jié)合proteinA，proteinA結(jié)合抗體Fc段，抗體結(jié)合抗原即發(fā)生特異標記的組蛋白，這里要注意組蛋白是和DNA結(jié)合的，這樣就把目標組蛋白和DNA的復合體沉淀下來了）。再將組蛋白與DNA分離，用獲得的DNA去做PCR分析和序列測定等檢測技術，從而進一步檢測哪些基因的組蛋白發(fā)生了修飾。
 

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